ELISA（酶联免疫吸附测定）作为一种高度敏感和特异的免疫分析技术，其运作基于三项核心原理，这些原理共同确保了检测的准确性和效率：

1. 固相吸附特性：ELISA技术的第一步涉及到将目标抗原或抗体物理吸附至固相载体表面，通常是聚苯乙烯微孔板。这种吸附并非随意，而是基于抗原或抗体分子与固相表面间的非共价相互作用，尤其是疏水性相互作用，这一过程保留了分子的免疫活性，使其能特异性识别并结合其对应抗体或抗原。

2. 酶标记的保持活性：接着，抗体或抗原会被共价连接到酶分子上，形成所谓的酶标记物。这个过程对保持酶的催化活性和抗体/抗原的免疫识别能力至关重要。酶标记物能在保持免疫学特性的基础上，通过其催化活性对底物进行转化，从而生成可检测的信号，如颜色变化。

3. 信号量化与分析：当酶标记的抗体或抗原与样品中的对应抗原或抗体结合后，形成的复合物会在加入特定底物后产生颜色反应。此颜色的深浅与样品中目标分子的浓度直接相关，即浓度越高，颜色越深。通过比色测定，可以定量分析出样品中目标抗原或抗体的精确含量，从而实现对特定分析物的定性及定量检测。

ELISA技术凭借其独特的优势，如高灵敏度、特异性强、操作简便快捷、结果稳定及易于自动化等特点，已被广泛应用于多个领域的研究与诊断中。它不仅能够用于多种传染病、寄生虫病以及非传染性疾病标志物的免疫诊断，还能实现大分子和小分子抗原的精确定量，适用于临床样本检测及大规模血清流行病学调查。此外，ELISA的应用范围还在不断拓展，涵盖了细胞内成分的免疫酶定位、抗酶抗体的研究、微量免疫复合物的可视化，以及体液中抗原或抗体的精确定量分析，彰显了其在生物医学研究和疾病早期诊断中的重要价值。