【实验步骤】

　　1.组织块解冻，用生理盐水洗去血污，剪取约0.5g组织，剪小放入2.0ml离心管中，用FM-200P研磨45秒;

　　2.加入0.45ml TES混匀，再加入50ul SDS(10%)，5.0ul蛋白酶K(20mg/ml)，充分混匀后，于56°C保温4-6h，每2h摇1次。

　　3.放置到室温，加入等体积饱和酚(500ul)，颠倒混匀，10000r/m，离心10m，分离水相和有机相，小心吸取上层含核酸的水相，到一个新的1.5ml离心管。

　　4.加入等体积酚：氯仿：异戊醇(25：24：1)，颠倒混匀，10000r/m，离心10分钟，取上层转移到新的1.5/2.0ml离心管中;

　　5.加入等体积氯仿：异戊醇(24：1)，颠倒混匀，10000r/m，离心10分钟，取上层清液到一个新的1.5/2.0ml离心管;

　　6.加入2.5倍体积的-20°C预冷的无水乙醇沉淀DNA，观察现象。

　　7.12000 r/m，离心10分钟，弃乙醇;

　　8.-20°C保存的75%乙醇洗涤，10000 r/m，离心5分钟，去乙醇，55°C干燥DNA;

　　9.加入适量TE溶解DNA(具体依DNA的多少而定)，-20°C保存备用;

　　【注意事项】

　　1.抽提每一步用力要柔和，防止机械剪切力对DNA的损伤。

　　2.取上层清液时，注意不要吸起中间的蛋白质层。

　　3.乙醇漂洗去乙醇时，不要荡起DNA。

　　4.离心后，不要晃动离心管，拿管要稳，斜面朝外。