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    中性粒细胞吞噬功能的测定操作方法

    [2012/11/6]

      中性粒细胞(Poly morpho nuclearleukocyte,PMN )的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等,是机体天然免疫力的重要组成部分。

      试剂及材料

      1.白色葡萄球菌

      2.肉汤培养基

      3.硷性美蓝液

      操作方法

      1.菌液的制备将白色葡萄球菌接种于中,放37℃温箱内培养12h左右;置水浴中加热100℃10min杀死细菌,用无菌生理盐水稀释成6×108细菌/ml备用;

      2.用血红蛋白吸管吸取受试者耳垂或指血40μl,立即加入盛有20μl肝素(浓度为20U/ml)的洁净凹玻片的凹孔内,轻轻搅动混匀,再加上述葡萄球菌菌液20μl充分混匀。然后置入铺有湿纱布的有盖容器内(此容器先放37℃温箱中预温),在37℃温箱中作用30min,其间每隔10min摇匀一次;

      3.作用完毕,取1小滴混合液置于洁净无油污的载玻片一端,推成薄片。待干后,用甲醇固定4~5min,硷性美蓝液染2~3min,置油镜下观察。随机计数100个中性粒细胞,分别记录发生吞噬和未吞噬的白细胞数,对有吞噬作用的白细胞,应同时记录所吞噬的细菌数;

      结果分析

      吞噬细胞%=即100个中性粒细胞中吞噬有细菌的细胞数;

      吞噬指数=将100个中性粒细胞所吞噬的细菌总数除以100,得到每个白细胞吞噬细菌的平均数,即为吞噬指数。

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