一、工前检查：

1、检查设备清洁合格并在有效期限内，且未被再次污染，有“设备完好”标识。

2、检查设备电源线连接正常。

3、检查电源供电正常。

4、检查二氧化碳供气正常，连接正常，无泄漏。

5、检查二氧化碳箱门密封完好。

二、工前准备：

1、设备内外表面清洁消毒。

（1）用洁净抹布沾纯化水清洁设备内外表面至无可见异物。

（2）用洁净抹布沾消毒剂对内外表面消毒。

（3）连接紫外灯电源打开紫外灯开关，对二氧化碳培养箱内箱紫外照射消毒30分钟。

（4） 消毒结束，关闭紫外灯开关，拔下紫外灯电源。

（5）清洁结束，操作人员填写清洁记录，QA验收合格。

2、加水

（1）打开二氧化碳箱门，打开玻璃观察门。

（2）将经过高压灭菌器高压消毒的纯化水加入箱内底部水位刻度线以上位置。

（3）关闭玻璃观察门，关闭二氧化碳箱门。

三、设备操作

1、连接二氧化碳箱电源，将电源开关从“O”位置至于“-”位置，电源指示灯亮，显示屏显示。

2、设定值确认：显示屏初始化后，显示两组数据，上面一组为二氧化碳培养箱箱内温度，下面一组为二氧化碳培养箱箱内CO2浓度。按显示屏右边温度按键，显示设定温度37℃，确认后松开温度按键，按显示屏右边CO2按钮，显示CO2浓度设定5%，确认后松开CO2按键。

3、显示屏初始化后显示二氧化碳培养箱箱内温度，按温度设定值开始加温至37℃，开始保持。

4、显示屏初始化后显示二氧化碳培养箱箱内CO2浓度，按CO2浓度设定值开始充气至CO2浓度为5%，开始保持。

5、二氧化碳培养箱温度、CO2浓度达到设定值后稳定2小时，设备进入正常待机状态。

6、打开二氧化碳培养箱箱门，打开玻璃观察门。

7、将装有细胞的多孔板或培养瓶放至于培养箱搁板规定位置。

8、 关闭玻璃观察门、关闭二氧化碳培养箱箱门。

9、当细胞需要传代或完成细胞膜片培养需要取出时，打开二氧化碳培养箱箱门，打开玻璃观察门。

10、取出装有细胞的多孔板或培养瓶，关闭玻璃观察门、关闭二氧化碳培养箱箱门。

11、当二氧化碳培养箱无细胞培养时，将二氧化碳培养箱开关从“-”位置至于“o”位置，电源开关关闭，拔掉电源插头。

12、填写设备使用记录。

1. 设备清洁：

   目 的：建立BB15二氧化碳培养箱标准操作规程，指导二氧化碳培养箱的正确使用与维护。

   1、设备正常运行时，应对设备外表面进行清洁消毒。

   （1）清洁频次：一次/周

   （2）设备外表面清洁消毒方法

   ①用洁净抹布沾纯化水清洁设备外表面至无可见异物。

   ②用洁净抹布沾消毒剂擦拭设备外表面对外表面消毒。

   2、设备使用结束时，应拔下电源插头，对设备内外表面进行清洁。

   （1）清洁方法

   ①用洁净抹布沾纯化水清洁设备外表面至无可见异物。

   ②用洁净抹布沾消毒剂擦拭设备外表面对外表面消毒。

   3、清洁结束，QA验收合格，操作人员填写清洁记录。

    

   五、二氧化碳培养箱运行时换水

   1、水：经过立式蒸汽灭菌器121℃，时间30分钟消毒的纯化水。

   2、水更换周期：一次/2周。

   3、水更换工具：抽水器 容器

   3、更换方法

   （1）打开二氧化碳培养箱箱门，打开玻璃观察门。

   （2）将抽水器排放管放于容器内。

   （3）将抽水器吸水管放于二氧化碳培养箱吸水孔位置。

   （4）提压抽水器手柄至将二氧化碳培养箱内水抽完。

   （5）加入准备好的纯化水至箱内底部水位刻度线以上位置停止，加水完毕。

   （6）关闭玻璃观察门、关闭二氧化碳培养箱箱门。

   4、填写换水记录。

    

   六、维护保养

   1、如果设备超过一月以上未使用，每月要通电试机一次。

   2、设备连续运行三个月自检一次。

   （1）自检方法

   ①在设备运行状态下，打开二氧化碳培养箱箱门，打开玻璃观察门。

   ②设备出现按下“auto”显示屏变成“----”关闭玻璃观察门，关闭二氧化碳培养箱箱门。

   ③自检结束，显示屏显示正常的温度和CO2浓度值。

   3、填写维护保养记录